Окраска Микроорганизмов

Метод бактериол. Исследования, применяемый для обнаружения и изучения микробов при микроскопировании препаратов. Последние могут быть приготовлены из культур микробов или нативного материала — тканей органов, крови, мокроты, мочи, фекалий, гноя, молока и других (см. Бактериологическое исследование ). О. М.— сложный физико-химич. Процесс, при к-ром существенную роль играют рН среды, адсорбция, капиллярные явления, электрич. Заряд и химич. Состав красителя и окрашиваемых объектов. Эти факторы определяют взаимодействие отдельных структур микробной клетки с тем или иным красителем. На результаты О. М. Оказывают влияние физиол. Состояние микробов, способ приготовления препарата и метод окраски. Для О. М. Применяют анилиновые красители, большая часть к-рых— соли кислот или оснований, поэтому эти красители, в свою очередь, подразделяются на основные и кислые.

Для О. М. Применяют гл. Обр. Основные красители, т. К. Они быстрее фиксируются микробной клеткой. Кислые красители используют преим. Для окрашивания фона препарата в контрастный цвет. Существуют также нейтральные красители (краска Романовского — Гимзы). В микробиол. Практике наиболее употребительны анилиновые красители. Красные — основной фуксин, сафранин, нейтральный красный, Конго красный. Синие — метиленовый синий, толуидиновый синий, опаловый синий. Фиолетовые — метил фиолетовый, кристаллич. Фиолетовый, генциан фиолетовый, фиолетовый Гофмана. Зелёный [зеленый] — малахитовый зелёный [зеленый], бриллиантовый зелёный. [зеленый;] жёлто-коричневые [желто-коричневые] — везувин, хризоидин. Из красителей готовят водные или спиртово-водные р-ры.

Для улучшения красящей способности нек-рых красителей к р-рам добавляют фенол, едкий калий, буру и др. Приготовление рабочих р-ров проводят по определённым [определенным] прописям. Окраску производят как живых (витальная окраска), так и убитых микробов, фиксированных на предметном стекле. Для витальной О. М. Готовят препараты раздавленной или висячей капли. Краситель разводят в физиол. Р-ре хлорида натрия (1:10000—1:100000). Живые микроорганизмы окрашиваются плохо, поэтому наиболее распространена окраска убитых микробов. О. М. Проводят простым и сложным методами. При простом методе применяют к.-л. Один краситель в рабочем р-ре, к-рым окрашивают препарат в течение 1—2 мин. Затем краску смывают дистил. Водой и высушивают препарат фильтровальной бумагой.

Микробы окрашиваются в цвет используемого красителя. При сложном методе используют 2 красителя (основной и дополнительный) и различные реактивы. Этот метод позволяет отличить одну группу микробов от другой, выявить отдельные элементы микробной клетки (споры) или химич. Вещества цитоплазмы (зёрна [зерна] волютина, нуклеотиды). К сложным методам О. М. Относят. Окраску по Грану, окраску кислотоустойчивых микробов (методы Циля — Нельсена и др.), спор микробов (методы Ожешко, Пешкова, Мюллера и др.), зёрен [зерен] волютина (методы Нейссера, Мейера), нуклеотидов (метод Фейльгена) и др. Во всех этих позитивных методах красители действуют непосредственно на микробную клетку. Существуют и негативные методы О. М., основанные на окрашивания фона препарата, на к-ром контрастно видны непрокрашенные микробы.

Эти методы применяют в тех случаях, когда изучаемые микроорганизмы (напр., спирохеты) или отдельные элементы микробной клетки (напр., капсула) плохо окрашиваются. В нек-рых случаях используют комбинированные методы О. М., включающие позитивный и негативный способы окраски (метод Гинса для обнаружения капсул). Широкое распространение получили флюоресцентные красители, соединённые [соединенные] с сывороткой, содержащей антитела против микроба определённого [определенного] вида, благодаря чему при люминесцентной микроскопии происходит свечение этих микробных клеток. См. Также Микроскопия . Лит. Розанов Н. И., Микробиологическая диагностика заболеваний с.-х. Животных, М., 1952. Роуз Э., Химическая микробиология, [пер.

С англ.], М., 1971..