Лигандообменная Хроматография

Основана на разл. Способности разделяемых соед. Образовывать комплексы с катионами металлов. В зависимости от того, локализованы комплексообразующие катионы в неподвижной фазе (благодаря ионным или координац. Связям) или перемещаются вместе с разделяемыми в-вами в подвижной фазе, различают хроматографию лигандов и Л. Х. Комплексов. В первом случае лиганды удерживаются вследствие образования смешанных т. Наз. Сорбционных комплексов, содержащих фиксированные группы неподвижной фазы, во втором случае комплексы распределяются между фазами. В качестве комплексообразователей используют ионы Сu2+, Ni2+, Zn2+, Cd2+ , Co2+, Mg2+ , Fe3+ и нек-рые др., комплексы к-рых лабильны, т. Е. Легко обменивают свои лиганды. При использовании инертных комплексов Со 3+ и Сr3+ обмен лигандов осуществляется во внеш.

Координац. Сфере. Подвижной фазой м. Б. Любая жидкость, координирующаяся слабее разделяемых лигандов, или газ. В газовой Л. Х. Соль или комплекс переходного металла растворены в неподвижной фазе. Сорбентами служат способные удерживать катионы металлов катионообменные смолы, содержащие преим. Карбоксильные группы, или селективные (комплексообразующие) смолы, в частности с аминокислотными или иминодиацстатными фиксированными группами. В высокоэффективной жидкостной Л. Х. Используют пористые силикагели с химически привитыми лигандами или прочно адсорбированными комплексообразующими соединениями. При Л. Х. Комплексов применяют любые сорбенты, если они обеспечивают удерживание разделяемых соединений. Удерживание регулируют путем изменения рН подвижной фазы, добавлением к ней орг.

Соед. Или конкурирующих за координацию с металлом лигандов, напр. NH3. С помощью Л. Х. Удается выделять и разделять соед., склонные к координации с ионами металлов, в присут. Больших кол-в минер. Солей и некоординирующихся в-в. Напр., с использованием иминодиацетатной смолы с ионами Сu2+ из морской воды выделяют своб. Аминокислоты. На катионитах с ионами Fe3+ разделяют фенолы, с ионами Ag+ - сахара. На карбоксильных катионитах с Ni2+ разделяют амины, азотсодержащие гетероциклы, алкалоиды. На силикагеле с нанесенным слоем силиката Сu2+ в водно-орг. Среде в присут. NH3 проводят быстрый анализ смесей аминокислот и пептидов, причем элюируемые из колонки комплексы легко детектируются спектрофотометричeски. На высокопроницаемых декстрановых сорбентах с иминодиацетатными группами, удерживающими ионы Zn2+, Ni2+ или Сu2+, селективно выделяются из сложных смесей индивидуальные белки и ферменты, содержащие на пов-сти своих глобул остатки гистидина, лизина или цистеина.

Силикагели с фиксированными на пов-сти инертными трис -этилендиаминовыми комплексами Со 3+ используют для т. Наз. Внешнесферной Л. Х. Смесей нуклеотидфосфатов. Методом газовой Л. Х. С помощью фаз, содержащих соли Ag+, разделяют олефины, ароматич. Соед., простые эфиры. Тонкослойная Л. Х. На носителях, пропитанных солями Ag+, применяется для анализа стероидов и липидов. Особенно эффективна Л. Х. При разделении изомеров, в т. Ч. Энантиомеров. На полистирольных сорбентах с группами оптически активных a-аминокислот, координированных с ионами Сu2+ , разделяют энантиомеры аминокислот, гидроксикислот, аминоспиртов, диаминов, получают препараты оптически активных аминокислот, меченные радиоактивными изотопами. Быстрое определение энантиомерного состава смесей аминокислот проводят с помощью силикагелей с привитыми группами, напр.

N-алкилен-L-гидроксипролина или N-(n-этилбензил)-L-гидроксипролина в присут. Ионов Сu2+ в элюенте. Высокоэффективный хиральный сорбент получают адсорбцией N-децил-L-гидроксипролина или октиламида L-гидроксипролина на гидрофобной пов-сти т. Наз. Обращенно-фазного силикагеля, модифицированного октадецилсиланом. Энантиомеры аминокислот эффективно разделяют в элюентах, содержащих оптически активные комплексы Сu2+ с проливом, N,N,N',N'-тетраметилпропилендиамином или N,N-дипропилаланином, на ахиральных стандартных сорбентах - сульфокатионите, силикагеле или обращеннофазном силикагеле соответственно. Такая модификация Л. Х. Носит назв. Метода хирального элюента. Капиллярной газовой хроматографией на сквалане, содержащем комплексы Rh+ или Ni2+ с 3-трифторацетил-(1R)-камфорат-анионом, разделяют энантиомеры хиральных олефинов и простых эфиров.

Л. Х. Была предложена Ф. Гельферихом в 1962. Лит. Даванков В. А., "Ж. Всес. Хим. Об-ва им. Д. И. Менделеева", 1983, т. 28, № 1, с. 25-29. Davankоv V. А., Кurganov A. A., Bochkov A. S., в сб. Advances in chromatography, v. 22, N.Y., 1983. P. 71-116. Davankov V. A., Navratil T. D., Walton H. F., Ligand exchange chromatography, N.Y., 1988. B. A. Даванков.