Грама метод

Метод дифференцированной окраски бактерий, при к-ром одни бактерии окрашиваются в темно-фиолетовый цвет (грамположительные бактерии, см.), др. -в красный или розовый (грамотрицателъные бактерии,см.). Сущность метода состоит в том, что клеточная стенка грам+ бактерий прочно фиксирует генцианвиолет, не обесцвечивается этанолом и потому не воспринимает дополнительный краситель (фуксин). У грам- микробов генцианвиолет легко вымывается из клетки этанолом, и они окрашиваются дополнительным красителем. Техника окраски. 1) на фиксированный препарат помещают полоску фильтровальной бумаги и на нее наносят р-р генцианвиолета (см. Красители) на 1 - 2 мин. 2) краситель и фильтровальную бумагу сливают и препарат обрабатывают в течение 1 мин р-ром Люголя (см.

Люголя раствор). 3) р-р Люголя сливают и на препарат наносят на 30 с 95% этанол. 4) промывают водой, воду сливают и препарат докрашивают дополнительным красителем (водным фуксином) в течение 1-2 мин. 5) промывают водой, высушивают и микроскопируют. Общим правилом для всех этапов является более длительная экспозиция в случае толстых мазков (из материала, из плотной среды) и более кратковременная, если мазки тонкие, напр., из бульонной к-ры. В связи с недостаточной стандартностью методики и возможными ошибками в ней (перекрашивание или недоокрашивание одним из красителей, несоблюдение экспозиции или концентрации реактивов, передержка или недодержка этанола, несливание воды и др.) результат окрашивания может быть неправильным.

Для контроля за этим целесообразно на том же мазке рядом делать препарат из смеси заведомо грам+ и грам- микробов. С др. Стороны, следует иметь в виду, что некоторые виды бактерий окрашиваются грамвариабельно.(Источник. «Словарь терминов микробиологии»).