Серологический метод

(в д-ке инфекц. Заболеваний)- совокупность пробирочных реакций, основанных на Аг -Ат-взаимодействии(см.) и направленных на выявление в с-ке крови и др. Жидкостях организма Ат к Аг возбудителей инфекц. Болезней. К С. М. Также следует отнести пробирочные реакции, имеющие целью обнаружение в с-ке крови и др. Субстратах растворимых микробных Аг с помощью стандартных иммунных с-к. Из группы реакций, базирующихся на взаимодействии Ат и Аг, в С.м. Не входят реакции, к-рые ставят на животных или людях (напр., Шика, Дика пробы), и серол. Идентификация к-р микроорганизмов (это один из этапов бактериол. Метода). В С.м. Также не включают реакции на обнаружение С , лизоцима и др. Антимикробных белков, поскольку механизм действия их иной.

С.м. Характеризуется высокой чувствительностью и специфичностью. Большинство реакций этого метода просты в проведении и учете, доступны широкому кругу лабораторий, как правило, безопасны, экономичны, поддаются стандартизации. К недостаткам С.м. Можно отнести. 1) косвенный характер результата, когда об этиологии болезни судят не по выделению возбудителя, а по ответу организма на возбудитель. 2) необходимость парентерального вмешательства в организм б-ного, таящая опасность заноса инфекции. 3) в большинстве случаев позднюю постановку д-за, особенно при использовании метода парных с-к. 4) возможность принять анамнестические Ат (как результат ранее перенесенного заболевания или вакцинации) за Ат к текущей инфекции.

С.м. Выявления циркулирующих Аг возбудителя лишен недостатков, указанных в 3-м и 4-м пп., но техника его применения и оценка результатов в силу ряда обстоятельств, в т.ч. Субъективных, полностью не отработаны. Первый этап С.м. - сбор материалов для исследования (см.). В большинстве случаев материалом является сыворотка крови (см.). Ее следует забирать в строго асептических условиях, в стерильную и чистую посуду из локтевой вены или из подушечки концевой фаланги 4-го или 5-го пальца, утром, натощак, обычно на 1 -3-й нед. Болезни, а затем-еще раз, спустя 10-14 дней. С-ку относительно долго можно хранить в замороженном состоянии. При некоторых заболеваниях материалом для С.м. Могут служить ликвор, моча, фильтрат испражнений, промывные воды бронхов, полости рта, глотки, носа.

Выбор серол. Реакции для данного случая зависит от цели исследования, предполагаемого заболевания, фазы болезни, материала для исследования, чувствительности реакции, возможностей конкретной лаборатории. Для выявления Ат, а также Аг используют РА (см.), РПГА (см.), РИФ (см.), РТГА (см.), преципитации (см.), флоккуляции (см.), набухания капсулы иммунного (см.), опсонизации (см.), иммобилизации бактерий (см.), РН (см.), РСК(см.), РИА (см.), ИФА (см.), иммуноэлектрофоретический (см. Иммуноэлектрофорез) и др. Методы. Разнообразным серол. Реакциям свойственно несколько общих характеристик. Прежде всего, о чем уже упоминалось, они являются реакциями взаимодействия Ат и Аг. Во всех случаях для установления присутствия Ат в иссл.

Субстрате необходим набор известных стандартных корпускулярных или растворимых Аг, называемых диагностикумами. В свою очередь, для установления присутствия Аг нужен набор сывороток иммунных диагностических (см.). Взаимодействие Аг и Ат осуществляется только в присутствии электролита, в качестве к-рого обычно используют физраствор или буферные смеси, рН системы должен быть около 7. Образование специфического иммунного комплекса происходит быстро. Видимого простым глазом феномена (агглютинации, лизиса и др.) - медленно, через несколько часов или даже суток. Максимальный по выраженности и времени эффект проявляется в зоне эквивалентных соотношений. При избытке Аг и Ат отмечается задержка видимого проявления реакции ( Прозана, см.).

Иммунный комплекс и агломерат характеризуются способностью к диссоциации с сохранением исходных св-в Аг и Ат. Диссоциация увеличивается при повышении рН до 9-10 или понижении его до 5 -3, повышении концентрации электролита до 15% и температуры- до 60°С, иногда вследствие сильного разведения смеси. Учет серол. Реакций осуществляют визуально, иногда с помощью лупы и редко - микроскопа. При оценке С.м. Применяют 3 главных критерия. Наличие и интенсивность реакции (в плюсах и др.). Диагностический титр, заранее отработанный для всех заболеваний, при к-рых используют серол метод. Нарастание титра Ат в течение болезни в 4 раза и более. В процессе оценки С.м. Часто возникает необходимость отличить специфическую реакцию (на видовые и типовые Аг) от группоспецифической (на межвидовые Аг) и иммунный ответ на текущую инфекцию - от иммунного ответа на перенесенное ранее заболевание и иммунизацию.

В первом случае дифференциация основывается на использовании монодиагностикумов, скорости нарастания титра Ат, к-рая выше к специфическим Аг, реакции адсорбции Ат избытком Аг, легкости диссоциации иммунного комплекса под влиянием диссоциирующих факторов. Во втором случае для дифференциации применяют темпы нарастания титра Ат, к-рые выше при текущей инфекции, особенности проявления реакции и классов Ig, сопоставление результатов С.м. С бактериол. И клин, данными.(Источник. «Словарь терминов микробиологии»).