Питательные среды бактериологические

Жидкие, полужидкие или плотные субстраты, используемые для выращивания микроорганизмов в лабораторных или производственных условиях. Используют для выделения чистых к-р бактерий, грибов и простейших из биогенных или абиогенных объектов, для определения культуральных и ферментативных св-в, а также устойчивости к хим., физ. И биол. Факторам. Для накопления микробной биомассы и продуктов биосинтеза, хранения музейных к-р. П.с. Должны содержать в достаточном количестве неорганические соли, воду, источники углерода, азота, в ряде случаев - ростовые факторы. Быть настолько влажными, чтобы процесс простой диффузии проходил без затруднений. Прозрачными, чтобы можно было визуально или под микроскопом наблюдать за ростом микробов.

Стерильными, чтобы знать, какому микробу принадлежат те или иные св-ва. Иметь оптимальные концентрацию водородных ионов и окислительно-восстановительный потенциал. В зависимости от состава различают минеральные и органические среды. Природные, представляющие собой природные субстраты (молоко, желчь, кровь, с-ка, картофель). Искусственные, содержащие смесь природных органических веществ и продуктов их кислотного или ферментативного распада. Синтетические среды состоят из забуференной солевой основы и р-ров аминокислот, углеводов, пуринов, пиримидинов, нуклеотидов, нуклеозидов, жирных к-т, витаминов. Конкретный состав среды зависит от потребностей вида в питательных веществах. Основой искусственных органических сред являются мясная вода, мясной экстракт, кислотный и ферментативный гидролизаты казеина, свернутой крови, сои гидролизат.

К основе добавляют натрия хлорид, пептон, дрожжевой экстракт, настои печени, мозга, экстракт эритроцитов, с-ку, кровь, углеводы, аминокислоты и др. Плотные и полужидкие среды готовят из жидких добавлением уплотнителя, обычно агара (0,5 - 3%). В зависимости от назначения П.с. Делят на простые или общеупотребительные (МПА, МПБ, пептонная вода), дифференциально-диагностические (плотные и жидкие рН-индикаторные, восстановительные, деполимеризующие и др.), специальные селективные или элективные, на к-рых только или преимущественно растут определенные виды или группы видов. Прозрачность П.с. Придают фильтрованием через ватно-марлевые бумажные или тканевые (из миткаля, бальтинга) фильтры и осветлением вспененным водным р-ром (1.

2) куриного белка (1 яйцо на 1 л среды), 10 мл свежей с-ки крови (на 1 л среды). После добавления белка среду взбалтывают, кипятят 10 мин, корригируют рН, фильтруют ее через ватно-марлевый фильтр, стерилизуют. РН сред устанавливают с помощью индикаторов рН (см.), колориметрическим или электрометрическим способом. Колориметрический способ установления рН основан на том, что окрашенные р-ры индикаторов принимают различные оттенки в зависимости от концентрации водородных ионов в среде. Обычно рН сред определяют посредством индикаторной шкалы Михаэлиса в компараторе Уолпола, к-рый представляет собой колодку, имеющую 6 вертикальных каналов с диаметром бактериол. Пробирки. Каналы расположены в 2 ряда по 3. Через каналы проходят сквозные горизонтальные отверстия.

На задней стенке против отверстий вставлены матовые (молочные) или синие стекла. Для того чтобы установить рН, в передний ряд помещают в центре пробирку с 2 мл иссл. Среды, в нее доливают 4 мл дистил. Воды и 1 мл индикатора (0,3% водный р-р метанитрофенона), в боковые отверстия - пробирку с 2 мл иссл. Питательной среды и 5 мл дистил. Воды (без индикатора). В крайние каналы заднего ряда вставляют пробирки со стандартными р-рами с такими показателями рН, между к-рыми хотят определить рН, в среднюю пробирку заднего ряда помещают пробирку с дистил. Водой (без индикатора). Наблюдение ведут через горизонтальную щель в проходящем свете. Реакция среды будет соответствовать реакции стандартного р-ра, с к-рым она совпадает по цвету.

Если необходимо скорректировать рН среды, то в крайние каналы устанавливают пробирки с требуемым стандартным р-ром и средой с рН, близким к таковому стандартного р-ра, и по каплям или мерно добавляют р-р щелочи или к-ты до тех пор, пока окраска среды не станет одинаковой с цветом стандартного р-ра. Затем рассчитывают, сколько следует добавить щелочи или к-ты, учитывая, что испытывалось 2 мл среды. Для более точного определения рН среды пользуются потенциометром согласно приложенной к нему инструкции. Готовые среды подлежат контролю. Обязательным контролем во всех случаях является биол., заключающийся в посеве на среду типового штамма того вида, для к-рого она предназначена. Существуют также методы контроля физ.-хим.

Св-в и хим. Состава среды, указанные в стандарте. См. Также Стерилизация.(Источник. «Словарь терминов микробиологии»).